Բակտերիոլոգիական մեթոդի օգտագործումը հնարավորություն է տալիս մեկուսացնել պաթոգենը մաքուր մշակույթում `հիվանդից ստացված նյութից, և նույնականացնել այն` հիմնվելով հատկությունների բարդության ուսումնասիրության վրա: Բակտերիաների մեծամասնությունը ունակ է մշակել տարբեր արհեստական \u200b\u200bսննդանյութերի միջոցներով (բացառությամբ քլամիդիայի և ռիկետցիայի), ուստի մանրէաբանական մեթոդը կարևոր է բազմաթիվ վարակիչ հիվանդությունների ախտորոշման գործում:

Դրական արդյունքի դեպքում բակտերիոլոգիական մեթոդը թույլ է տալիս որոշել ընտրված պաթոգենի զգայունությունը հակամանրէային գործակալների նկատմամբ: Այնուամենայնիվ, այս ուսումնասիրության արդյունավետությունը կախված է բազմաթիվ պարամետրերից, մասնավորապես նյութերի հավաքման պայմանները  և նրա տեղափոխում  լաբորատորիա:

Դեպի հիմնական պահանջներըներկայացված մանրեաբանական հետազոտության համար նյութի ընտրության և տեղափոխման համար ներառում են.

• նյութեր վերցնելը նախքան էիթոտոպային բուժումը սկսելը.
• նյութը հավաքելիս ստերիլ պայմաններին համապատասխանելը.
• նյութերի հավաքման տեխնիկական ճշգրտություն;
• բավարար քանակությամբ նյութ;
• նյութի պահպանման և տեղափոխման ջերմաստիճանային ռեժիմի ապահովում.
• նյութի հավաքման և ամուր սննդանյութերի վրա ցանելու միջև ընկած ժամանակահատվածի նվազագույնի հասցումը:

Նյութը պետք է տեղափոխվի լաբորատորիա որքան հնարավոր է շուտ, բայց հավաքագրումից ոչ ավելի, քան 1-2 ժամ հետո: Նյութի նմուշները պետք է լինեն որոշակի ջերմաստիճանում; մասնավորապես, սովորաբար ստերիլ նյութեր (արյուն, ուղեղային հեղուկ) պահվում և լաբորատորիա են հանձնվում 37 ° C ջերմաստիճանում: Ոչ ստերիլ նյութեր (մեզի, օդուղի և այլն) պահվում են սենյակային ջերմաստիճանում ոչ ավելի, քան 1-2 ժամ կամ ոչ ավելի, քան մեկ օր 4 ° C ջերմաստիճանում (ներքին սառնարանային պայմանների): Եթե \u200b\u200bսահմանված ժամկետում հնարավոր չէ նմուշներ լաբորատորիա հանձնել, ապա խորհուրդ է տրվում օգտագործել տրանսպորտային միջոցներ, որոնք նախատեսված են պահպանման պայմաններում պաթոգենների կենսունակությունը պահպանելու համար:

Արյուն հետազոտության համարպետք է հիվանդից վերցնել մարմնի ջերմաստիճանի բարձրացման ժամանակ, տապի առաջացման ժամանակ: Առաջարկվում է ուսումնասիրել 4-6 ժամ ընդմիջումներով վերցված 3-4 արյան նմուշներ, ինչը արդարացված է «բացակայող» անցողիկ բակտերիա ռիսկը նվազեցնելու տեսանկյունից և բարձրացնել արյունից մեկուսացված պայմանականորեն ախտածին միկրոֆլորայի էթոլոգիական դերը հաստատելու ունակությունը, եթե այս միկրոֆլորան հայտնաբերվում է մի քանի երակային նմուշներում: արյուն: Մեծահասակների մեջ 10 մլ քանակությամբ արյան նմուշը և երեխաների մեջ 5 մլ սերմնացան առնվում է առնվազն երկու շշերի մեջ, միջինից `օդային և անաէրոբ միկրոօրգանիզմների համար, 1:10 հարաբերությամբ: Խորհուրդ է տրվում զարկերակային արյան մեկ ուսումնասիրություն:

Վերցրեք ուղեղային հեղուկ  (CSF) իրականացվում է լոմբարդային պունկցիայի միջոցով բժշկի կողմից `չոր ստերիլ խողովակի մեջ 1-2 մլ քանակությամբ: Նմուշը անմիջապես հանձնվում է լաբորատորիա, որտեղ նույնպես անմիջապես հետազոտվում է: Եթե \u200b\u200bդա հնարավոր չէ, նյութը պահվում է 37 ° C- ով մի քանի ժամվա ընթացքում: Զգալիորեն մեծացնում է բակտերիոլոգիական ուսումնասիրությունների դրական արդյունքների քանակը `CSF- ի 1-2 կաթիլներ ցանելով փորձնական խողովակի մեջ, որը պարունակում է գլյուկոզա ունեցող կիսաքաղ հեղուկ միջավայր, իսկ« Petri »ճաշատեսակում` «արյան» ագարով: Նյութը օգտագործելով իզոթերմական տուփեր, ջեռուցման բարձիկներ, թերմոսներ կամ ցանկացած այլ փաթեթավորում, որտեղ ջերմաստիճանը պահպանվում է մոտ 37 ° C ջերմաստիճանում:

Աղիքի շարժումներԲակտերիոլոգիական հետազոտության համար 3-5 գ-ն ընտրվում է ստերիլ փայտի սպաթուլաների միջոցով `ստերիլ ամանի մեջ ամուր ամրացված կափարիչով: Վերցված նյութի ուսումնասիրությունը պետք է սկսվի ոչ ուշ, քան 2 ժամ հետո: Եթե այս ընթացքում հնարավոր չէ սկսել ուսումնասիրությունը, ապա պետք է ընտրվի փոքր քանակությամբ նյութ, որը տեղադրված է համապատասխան տրանսպորտային միջավայրում: Աթոռ ընտրելիս պետք է ձգտել ուղարկել հետազոտության համար պաթոլոգիական կեղտեր (լորձ, թարախ, էպիթելի մասնիկներ և այլն), եթե այդպիսիք կան, խուսափելով արյան մեջ, որը մանրեազերծող հատկություններ ունի նյութի մեջ:

Նյութը վերցնելու համար կարող են օգտագործվել ռեկտալ տամպոններ (բամբակյա հուշում): Սվաղը պետք է խոնավացվի ստերիլ իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթով կամ մեքենայով (բայց ոչ յուղային գելով): Այն ներկայացվում է մեկ rectum- ի վրա 5-6 սմ խորության վրա և, պտտվելով տամպոնը, զգուշորեն հանեք այն, վերահսկելով տամպոնի վրա ֆեկալ գունազարդման տեսքը: Tampon- ը տեղադրվում է չոր փորձարկման խողովակի մեջ, եթե նյութի ուսումնասիրությունը սկսվի 2 ժամվա ընթացքում, հակառակ դեպքում տրանսպորտային միջավայրում:

Փիս(ազատորեն թողարկված մեզի միջին մասը) 3-5 մլ քանակությամբ հավաքվում է ստերիլ ուտեստների մեջ `արտաքին սեռական օրգանների մանրակրկիտ զուգարանից հետո: Նախընտրելի է առավոտյան մեզի բաժանել:

Ileիլըduodenal sounding- ի ընթացքում հավաքված բուժման սենյակում, առանձին, A, B և C բաժիններում երեք ստերիլ խողովակների մեջ, պահպանելով ասեպտիկ կանոնները:

Ստամոքսային լվացում  հավաքվում է ստերիլ բանկաների մեջ 20-50 մլ քանակությամբ: Պետք է հիշել, որ այս դեպքերում ստամոքսային լվացումը իրականացվում է միայն անտարբեր (միկրոօրգանիզմների վրա բակտերիոստատիկ կամ մանրեազերծիչ ազդեցություն չունենալու) լուծույթներով - նախընտրելիորեն խաշած ջուր (առանց սոդայի, կալիումի permanganate և այլն):

Փչոց. Հազալուծության պիտանիության ընթացքում թողարկված առավոտյան ցնցուղը հավաքվում է ստերիլ բանկայի մեջ: Հազալուց առաջ հիվանդը խոզանակ է տալիս ատամները և ողողում բերանը եռացրած ջրով, որպեսզի մեխանիկական կերպով հեռացնի սննդի բեկորները, աղազերծված էպիթելը և բերանի խոռոչի միկրոֆլորան:

Բրոնխի լվացման ջուր. Երբ բրոնխոսկոպիան կատարվում է ոչ ավելի, քան 5 մլ իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթ, որին հաջորդում է ստերիլ խողովակի մեջ դրա ներծծումը:

Անջատիչ ըմպան, բերան և քիթ. Բերանի խոռոչից ստացված նյութը վերցվում է դատարկ ստամոքսի վրա կամ ստերիլ բամբակյա շվաբրով կամ գդալով սնուցելուց 2 ժամ հետո լորձաթաղանթից և դրա տուժած տարածքներից `թուքավոր խցուկների, լեզուների մակերևույթի ծորակների մուտքի մուտքի մոտ: Ֆիլմի առկայության դեպքում վերջինս հանվում է ստերիլ պինցետներով: Քթի խոռոչից ստացված նյութը վերցվում է չոր ստերիլ բամբակյա շվաբրով, որը խորը ներմուծվում է քթի խոռոչի մեջ: Նազոֆարինգից ստացված նյութը վերցվում է ստերիլ հետին ֆարինգի բամբակյա շվաբրով, որը քթի բացման միջոցով խնամքով տեղադրվում է նազոֆարին: Եթե \u200b\u200bհազ է սկսվում, շվաբրը չի հանվում, մինչև հազը վերջանա: Դիֆթերիայի վերլուծություն անցկացնելու համար միաժամանակ զննում են ֆիլմերն ու լորձը քթից և ֆարինգից ՝ տարբեր տամպոններով նյութեր վերցնելով:

Ուսումնասիրված նյութը ցանում են պինդ սննդարար լրատվամիջոցների վրա `օգտագործելով հատուկ տեխնիկա` միկրոօրգանիզմների անհատական \u200b\u200bգաղութների աճը ստանալու համար, որոնք այնուհետև մաղվում են `պաթոգենի մաքուր մշակույթը մեկուսացնելու համար:

Բակտերիաների որոշ տեսակներ մեկուսացված են ընտրովի (ընտրովի) լրատվամիջոցների միջոցով, որոնք խանգարում են օտարերկրյա միկրոօրգանիզմների աճին կամ պարունակում են նյութեր, որոնք խթանում են որոշակի պաթոգեն միկրոբների աճը:

Միկրոօրգանիզմները մեկուսացված են սննդարար մամուլում նույնացնել, այսինքն որոշեք դրանց տեսակները կամ տիպի պատկանելիությունը: Վերջերս առողջապահական պրակտիկայում նույնականացման համար օգտագործվել են միկրոթեստային համակարգերը, որոնք հանդիսանում են մի շարք դիֆերենցիալ ախտորոշիչ միջավայր ունեցող վահանակներ, ինչը արագացնում է ուսումնասիրությունը: Microtest համակարգերը օգտագործվում են նաև միկրոօրգանիզմների զգայունությունը հակամանրէային գործակալների որոշման համար `հեղուկ սննդարար միջավայրում հակաբիոտիկի նոսրացման եղանակով:

Բակտերիոլոգիական ուսումնասիրության արդյունքները գնահատելով, բժիշկը պետք է հաշվի առնի, որ բացասական արդյունքը միշտ չէ, որ նշանակում է պաթոգենի բացակայություն և կարող է կապված լինել հակամանրէային գործակալների օգտագործման, բարձր մանրադիտական \u200b\u200bարյան գործունեության և տեխնիկական սխալների հետ: Հիվանդից նյութում պաթոգեն միկրոբ հայտնաբերելը, առանց կլինիկական նկարի հետ կապ ունենալու, հնարավոր է ցողունի, առողջ կամ անցողիկ բակտերիալ փոխադրման դեպքում:

Արյունից մեկուսացումը, ենթակա է օպորտունիստական \u200b\u200bմիկրոօրգանիզմների բոլոր ասեպտիկ կանոններին (համաճարակային ստաֆիլոկոկ, E. coli) և նույնիսկ սապրոֆիտները պետք է համարվեն բակտերեմիայի դրսևորում, մանավանդ, եթե այդ մանրէները հայտնաբերված են նյութի մեկից ավելի նմուշներում կամ տարբեր substrates (արյուն, մեզի), քանի որ մարմնի immunoreactivity- ի անկում, այս և այլ «ոչ պաթոգեն» միկրոօրգանիզմները կարող են լինել վարակիչ պրոցեսների, ներառյալ ՝ sepsis- ի պատճառող գործակալներ:

Որոշ դժվարություն կա ոչ ստերիլ միջավայրերի բակտերիոլոգիական ուսումնասիրությունների արդյունքների մեկնաբանությունը, մասնավորապես `օպորտունիստական \u200b\u200bմիկրոօրգանիզմների էթոլոգիական դերի վկայություն: Այս դեպքում, համալիրը հաշվի է առնում այնպիսի ցուցիչներ, ինչպիսիք են մեկուսացված մշակույթների տեսակը, նյութում այս տեսակի մանրէաբանական բջիջների քանակը, հիվանդության ընթացքում դրանց վերամեկուսացումը, մոնոկուլտուրայի առկայությունը կամ միկրոօրգանիզմի ասոցիացիան:

Յուշչուկ N.D., Vengerov Yu.Ya.

Բակտերիոլոգիական հետազոտության մեթոդաբանություն. Արյանից պաթոգենի մեկուսացումը (արյան մշակույթը) հիվանդությունների ախտորոշման վաղ մեթոդ է: Բակտերեմիան տիֆոիդ-պարատիֆոիդ հիվանդությամբ հիվանդների մոտ հայտնվում է ինկուբացիոն շրջանի վերջում և չի անհետանում հիվանդության ամբողջ փետրական ժամանակահատվածում և ռեցիդիվների ժամանակ: Բակտերիոլոգիական ուսումնասիրությունների արդյունքները որոշ չափով կախված են նյութի հավաքման ժամկետից և ցանված արյան քանակությունից: Որքան շուտ արյունը վարակվի հիվանդության սկզբից, այնքան մեծ է պաթոգենի հայտնաբերման հավանականությունը: Թիֆոիդ տենդի առաջին շաբաթվա ընթացքում հիվանդից արյունը վերցվում է Ուլնարի երակից ՝ 10 մլ քանակությամբ, ավելի ուշ, իսկ ռեցիդիվների ժամանակ ՝ 20 մլ:

Ուսումնասիրության առաջին օրը  հեղուկ լրատվամիջոցներից մեկում արյան ներարկումն իրականացվում է 1:10 հարաբերակցությամբ: Նշված հարաբերակցությունը պետք է խստորեն պահպանվի, քանի որ արյան ավելի քիչ նոսրացումով, մանրէները կարող են մահանալ դրա մանրեազերծիչ գործողության պատճառով: Սերմնացանի օգտագործման համար. Լեղու արգանակի 10% կամ 20% լուծույթ, 50-100 մլ-ով լցնել շշերի մեջ, մսի-պեպտոնի արգանակ `1% գլյուկոզայով, ստերիլ թորած ջուր` ըստ Ն.Ն. Կլոդնիցկիի մեթոդի, որի մեջ լիզում են արյան կարմիր բջիջները, դրանց քայքայման արտադրանքները միևնույն ժամանակ ծառայում են որպես բակտերիաների լավ բազմանդամ: Կարող եք նաև օգտագործել ստերիլ թակել ջուր: Լավագույն արդյունքները ստացվում են լեղի արգանակի վրա նյութ ցանելով: Եթե \u200b\u200bտեղում հնարավոր չէ արյուն ցանել, շիճուկը խառնուրդի կամ ցիտրատային արյան հետ միասին (10 մլ արյուն լցվում է փորձարկման խողովակի մեջ `2 մլ 5% ստերիլ նատրիումի ցիտրատ պարունակող 2 մլ), ուղարկվում է լաբորատորիա: Լաբորատորիաներում արյան խառնուրդ է ցանում և սերմացվում է այդ միջավայրերից մեկում: Vials տեղադրվում են ջերմոստատի մեջ 37 ° C ջերմաստիճանում:

Ուսումնասիրության երկրորդ օրը. Ուսումնասիրության մեկնարկից 14-24 ժամ անց նյութը սերմնացվում է էնդո միջին կամ միջին Petri ափսեի մեջ `էոզինով և մեթիլիլենով (Լևինի միջին): Խորհուրդ չի տրվում օգտագործել Պլոսկիրևի միջոցը սերմնացանի համար, քանի որ արյան մեջ գտնվող տիֆոիդ-պարատիպոիդ բեկիլները պարտադիր պարաթրոֆներ են ըստ տեսակի սննդի և միանգամից չեն փոխում այս տեսակի սննդամթերքը մետատրոֆիկ (այսինքն ՝ մեռած օրգանական substrates): Հետևաբար, աղի թթուներ պարունակող այս միջոցի մեջ տիֆոիդ բազիլները շատ վատ են աճում կամ ընդհանրապես չեն աճում: Առաջին սերմնացումից հետո մանրէների աճի բացակայության դեպքում հաջորդները արտադրվում են 48-ից, 72 ժամ հետո, 5-րդ և 10-րդ օրերին: Եթե \u200b\u200bպաթոգենը չէին կարող մեկուսացվել, բացասական պատասխան է տրվում: Կասկածելի դեպքերում, խորհուրդ է տրվում պարբերաբար - 3-4 անգամ մեկ անգամ - ցանել մինչև նյութը վերցնելու պահից մինչև 24-րդ օրը: Բացասական պատասխան դեռ տրված է 7-րդ օրը:

Հետազոտության երրորդ օրը. Էնդո և Լևին լրատվամիջոցներում աճեցված «կասկածելի» գաղութները (պաթոգեն մանրէաբանական գաղութները անգույն են Էնդոյի միջոցի վրա) պարզում են, թե ինչու են 2-3 գաղութներ տեղափոխվում ածած ագարի և Ռեսելի միջավայր:

Հետազոտության չորրորդ օրը. Հաշվի առեք և արձանագրեք Ռեսելի շրջակա միջավայրի վրա ցանելու արդյունքները, ուսումնասիրեք ընտրված մշակույթների մորֆոլոգիական հատկությունները Գրամի կողմից պատրաստված աղմուկով: Շարժունակությունը որոշվում է `ֆլագելայի առկայությունը կամ բացակայությունը` 4-6-ժամյա արգանակի մշակույթից վերցված կախված կամ մանրացված կաթիլում: Դա անելու համար ագար մշակույթը (մեկ հանգույց) սերմացվում է 1 մլ թեթևակի տաքացած արգանակի մեջ: Արդյունքում ընտրված մշակույթները (2-3 խողովակ) Giss- ի միջին վրա mannitol, sucrose and oblique agar- ով, ինչպես նաև մսով-պեպտոնով արգանակով 2 խողովակի մեջ, որոնցում ճեղքերի տակ տեղադրվում են ֆիլտրի թղթի շերտեր, որոնք խոնավացված են հատուկ լուծույթներով `ջրածնի ծծմբի և ինդոլի որոշման համար (ընդլայնված «Motley row»):

Հետազոտության հինգերորդ օրը. Փոփոխությունները գրանցվում են մանրամասն «խճճված շարքում»: Գազի ձևավորման առկայության դեպքում կատարվում է ագլուտացման ռեակցիա ՝ սաղմոնելլայի շիճուկների խառնուրդով: Եթե \u200b\u200bռեակցիան դրական է, ապա ագլուտացման ռեակցիա է իրականացվում O- և H- շիճուկներով, և վերջնական պատասխանը տրվում է բոլոր նշանների ընդհանուրության հիման վրա:

Myeloculture- ը մեկուսացված է ստացված ոսկրածուծի պունկցիան սալիկապատելով 3-5 մլ խոշոր եղջերավոր ստերիլ լեղի կամ 25-30 մլ 10% -անոց լուծույթային արգանակի մեջ, այն դնում է թերմոստատի մեջ և հաջորդ օրը ՝ փոխանցելով Endo կամ Wilson-Blair լրատվամիջոցներին: Հետազոտությունների հետագա փուլերը նույնն են:

Bacteriaարպից մանրեների մեկուսացում: Հիվանդության 8-10-րդ օրվանից, ավելի հաճախ `երրորդ շաբաթից, տիֆոիդ տենդով հիվանդների դեպքում պարատիպոիդ բակտերիաները արտազատվում են ֆեկցիաներով: Հետազոտության համար վերցրեք հեղուկ հետևողականության ֆեկցիաների վերջին մասը, էմուլգազերծեք իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթում (1:10 հարաբերությամբ) և թողեք 30 րոպե, մինչև խոշոր մասնիկները լուծվեն: Սերմնացանի համար հեղուկի մակերեւույթից վերցվում է մի կաթիլ նյութ:

Ուսումնասիրության առաջին օրը նյութը ներարկվում է հարստացման միջոցների վրա `լեղի արգանակ, մագնեզիում, Մյուլեր, Կաուֆման, և տեղադրվում է ջերմաչափի մեջ: Ուսումնասիրության երկրորդ օրը մշակույթի միջավայրը սալիկապատված է Ploskirev- ի, Endo- ի կամ Levin- ի և Wilson-Blair- ի (բիսութ-սուլֆիտ-ագար) լրատվամիջոցներով: Հետազոտության հետագա փուլերում նույնն են, ինչ արյան մշակույթի ընտրության հարցում:

Միզից թիֆոիդ-պարատիֆոիդ խմբի բակտերիաների մեկուսացումը լավագույնս կատարվում է հիվանդության երկրորդ երրորդ շաբաթից: Նախքան նյութը վերցնելը, urethra- ի արտաքին բացումը լվացեք ստերիլ իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթով; կանանց մոտ ավելի լավ է մեզի վերցնել կաթետերով: Հետազոտությունների համար վերցրեք 20-30 մլ մեզի: Centենտրիֆուգացումից հետո, գնդիկը սերմացվում է 2 ափսեի մեջ ՝ Պլոսկիրևի միջին կամ բիսմութ-սուլֆիտ ագարով: Գերբնական նյութը սերմացվում է հարստացման միջոցի վրա (10% լեղի արգանակ) և տեղադրվում է 24 ժամվա ընթացքում թերմոստատի մեջ, որից հետո դրանք մթնացվում են ընտրովի լրատվամիջոցներից մեկի 2 բաժակներում: Մեկուսացված գաղութները նույնացվում են սովորական ձևով:

Տասներկումատնյա պարունակության քննություն `լեղ: Մեթոդը հաճախ օգտագործվում է փշրման փուլում: Խառնուրդը հավաքվում է ստերիլ խողովակների փորձաքննության ընթացքում: Տասներկումատնյա պարունակությունը սերմացվում է շշերի մեջ 50 մլ արգանակով, իսկ մնացած նյութը, բերքի հետ մեկտեղ, տեղադրվում է ջերմաչափի մեջ ՝ 37 ° C- ում: Հաջորդ օրը ինոկոլյացիան կատարվում է 2 բաժակ խիտ դիֆերենցիալ միջավայրով: Մեկուսացված գաղութները նույնացվում են նկարագրված ընթացակարգով:

Խիստ զգայուն և խոստումնալից է տիֆոիդ տապի և պարաթիֆոիդ տենդի վաղ ախտորոշման մեջ իմունոֆլորեսցիայի մեթոդը, որն ուսումնասիրում է արյունը հիվանդության առաջին իսկ օրերից, 10-րդ օրվանից ՝ ֆեկցիաները, տասներկումատների պարունակությունը մարմնի նորմալ ջերմաստիճանի 10-րդ օրը: Հատուկ լյումինեսցենտային sera- ն նշում է տիֆոիդ-պարատիֆոիդ մանրէներ, որոնք հետագայում որոշվում են լուսատուների մանրադիտակով: Մեթոդը թույլ է տալիս ախտորոշել հիվանդությունը ուսումնասիրության սկսվելուց հետո 10-12 ժամ հետո:

Տիֆոիդ-պարատիֆոիդ հիվանդությունների սերոլոգիական ախտորոշում: Հիվանդության երկրորդ շաբաթվանից հիվանդների արյան մեջ հայտնվում են հատուկ հակամարմիններ, որոնք կարելի է որոշել Vidal ռեակցիայի միջոցով: Թիֆոզի տապով և պարատիպոիդով, կուտակվում են O- և ապա H-agglutinins- ները: Վի-ագglutinins երբեմն հայտնաբերվում են հիվանդության ընթացքում, բայց վերջիններս, ի տարբերություն փոխադրման, չունեն ախտորոշիչ արժեք: Տիֆոիդ տապի և պարաթիֆոիդ տենդի պատճառող գործակալով հիվանդների արյան մեջ հատուկ ագglutinins- ի որոշումը կարող է օգնել ախտորոշում հաստատել ինչպես հիվանդության սուր ժամանակահատվածում, այնպես էլ փխրունության ժամանակ:

Սալմոնելլոզով, Widal- ի ռեակցիան օժանդակ ախտորոշիչ մեթոդ է: Պետք է հիշել, որ հաճախ կան հիվանդության ձևեր ՝ թույլ արտահայտված իմունաբանական պատասխանով: Հատկապես հաճախ, ագլյուտինինների ցածր տիտրերը, մինչև դրանց բացակայությունը, նշվում են հակաբիոտիկների բուժմամբ հիվանդների մոտ:

Վիդալ ռեակցիայի համար 1-3 մլ արյունը մատից կամ ulnar երակից վերցվում է ստերիլ խողովակի մեջ: Արյան մակարդումը արագացնելու համար այն տեղադրվում է տերմոստատի մեջ 30 րոպե: Համակցված արյունը շրջանառվում է ապակե պուպետով և տեղադրվում սառնարանում, մինչև հայտնվի պարզ, լուծված շիճուկ: Սերմնահեղուկը օգտագործվում է պատվաստման համար (արյան մշակույթ): Ագլխինացման ռեակցիան իրականացվում է H- և O- տիֆոիդ, A- և B- պարատիպոիդ ախտորոշիչներով: Շիճուկը նոսրացվում է ՝ սկսած 1: 100-ից 1: 800 տիտրերով ՝ հետևյալ ընթացակարգի համաձայն: 9,9 մլ ստերիլ իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթ և 0,1 մլ փորձարկման շիճուկ լցվում են փորձարկման խողովակի մեջ - ձեռք է բերվում 1: 100 նոսրացում: 4 փորձարկման խողովակներում (ըստ Vidal- ի ռեակցիայի մեջ օգտագործվող հակածինների քանակով), և մեկում, որը ծառայում է որպես շիճուկի հսկողություն, 5 մլ նոսրացված 1 մլ շիճուկ է լցվում: Մնացած 5 մլ շիճուկից (1: 100 նոսրացում) 1 մլ է լցվում, իսկ 4 մլ իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդ լուծույթին ավելացվում է 4 մլ, իսկ ստացվում է 1: 200 նոսրացում: 1: 200 նոսրից 4 մլ նույնպես թափվում է 1-ական յուրաքանչյուր 4 փորձարկման խողովակների մեջ, իսկ 4-ը իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթով նորից ավելացվում են մնացած 4 մլ-ով `1: 400 նոսրացում ստանալու համար: Հետագա նոսրացումները (1: 800, 1: 1600) կատարվում են ինչպես նկարագրված է: 4 խողովակի մեջ, որոնք անտիգենների հսկողությունն են, լցնել 1 մլ իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթ: Բոլոր փորձնական խողովակներում, բացառությամբ նրանց, որոնք ծառայում են որպես շիճուկի հսկողություն, լցնել համապատասխան ախտորոշման 1-2 կաթիլ: Խողովակի դարակաշարքը ցնցվում է և տեղադրվում է ջերմաչափի մեջ 37 ° C- ում 24 ժամվա ընթացքում: H- ագլուտացումը (կոպիտ բամբակ) տեղի է ունենում 2 ժամ հետո, O- ագլուտացումը (նուրբ) - շատ ավելի ուշ: Արձագանքի ինտենսիվությունը նշվում է 24 ժամ անց: Վիդալ ռեակցիայի ախտորոշիչ տիտրը `ոչ պակաս, քան 1: 200 նոսրացման դեպքում` կլինիկական դրսևորումների առկայության դեպքում:

Պետք է հիշել, որ այս ռեակցիան կարող է դրական լինել այլ հիվանդությունների դեպքում `տուբերկուլյոզ, մալարիա, բրուցելոզ, չարորակ նորագոյացություններ և որոշ պայմաններ (հղիություն): Վիդալ ռեակցիան կարող է դրական լինել առողջ անհատների մոտ (տնային ռեակցիա), պատվաստված և անցյալի հիվանդության մեջ (անամնեզի ռեակցիա): Վիդալ ռեակցիայի առանձնահատկությունը բարձրացնելու համար Ֆիշերը առաջարկեց շիճուկը նոսրացնել նատրիումի քլորիդի հիպերտոնիկ լուծույթով (2.9 և 5.8%): Սա հանգեցնում է խմբային ռեակցիաների թուլացման կամ վերացման: Ագլխինացման ռեակցիայի արժեքը մեծանում է կրկնակի ուսումնասիրություններով, երբ հիվանդության դինամիկայով հաստատվում է հակամարմինների տիտրի աճ: Պարատիպոիդ A- ով Vidal- ի ռեակցիան կարող է լինել բացասական կամ հատուկ հակամարմինների տիտղոսը ավելի քիչ է, քան խմբային:

Վերջին տարիներին հիվանդության աղիքային խումբը ճանաչելու համար լայնորեն կիրառվել է պասիվ հեմատագլուտացման (RPHA) արձագանքը տիֆոիդ բակտերիաների մասնակի հակածինների հետ: RPHA- ն տրված է բարձր զգայունությամբ և առանձնահատկությամբ, այն դրական է հիվանդության 5-րդ օրվանից: Նվազագույն ախտորոշիչ տիտրը տիֆոիդ տենդով, պարատիֆոիդ տենդով, O- հակածինով սալմոնելլոզով հիվանդների դեպքում կազմում է 1: 200: Արձագանքը դրված է դինամիկայի մեջ `որոշելու հակամարմինների տիտրի բարձրացումը:

Թիֆոիդում և պարաթիֆոիդում բակտերիոկարիարիայի լաբորատոր ախտորոշման մեթոդները: Կեղտերի, մեզի և տասներկումատնյա պարունակության մանրէաբանական հետազոտությունը կատարվում է ընդհանուր ընդունված մեթոդների համաձայն: Լավագույն արդյունքները ստացվում են սելենիտային լրատվամիջոցների միջոցով:

Բակտերիաների մեկուսացման հաճախության պատճառով հաճախ հնարավոր չէ ցանել պաթոգենը: Թիֆոիդ տենդի բասիլների կրողների ճնշող մեծամասնության մեջ հայտնաբերվում են Vi անտիգեն պարունակող միկրոբներ, և, հետևաբար, հակամարմինները հայտնվում են սուր և քրոնիկ կրիչների արյան մեջ (դրանք ավելի քիչ տարածված են հիվանդների արյան մեջ): Արձագանքի ախտորոշիչ տիտղոսը 1:20 և ավելի է: Vi-agglutination- ի ռեակցիայի (տաքացվող շիճուկով) զուգահեռ, H- և O- տիֆոիդ ախտորոշումներով տեղադրվում է Vidal- ի ռեակցիան (հայրենի շիճուկով): Թիֆոիդ բակտերիոկարերների շիճուկում 1-ից 200-ից 1: 800-ի տիտերում H- հակամարմինները հայտնաբերվում են դեպքերի 60-80% -ով: H և Vi հակամարմինների համադրության առկայությունը առանձնահատուկ ախտորոշիչ նշանակություն ունի տիֆոիդ բազիլների կրողներին հայտնաբերելու գործում:

Հետազոտության լրացուցիչ մեթոդներից `տիֆինով մաշկի ալերգիկ թեստը, ինչպես նաև RPHA- ն Vi-antigen- ով, օգտագործվում են տիֆոիդ տենդի ձողերի փոխադրումը հայտնաբերելու համար:

Այսպիսով, վարակի աղբյուրի վաղ և ամբողջական նույնականացումը և չեզոքացումը կարևոր պայման է թիֆո-պարատիպոիդ հիվանդությունների դեմ պայքարի հաջողության համար: Ներկայումս տիֆի տապը տեղի է ունենում ինքնաբերաբար: Ավելին, հիվանդության ընթացքը պակաս երկար է և չի ուղեկցվում դասական ձևին բնորոշ բոլոր նշաններով, ինչը բարդացնում է կլինիկական ճանաչումը:

Վերոհիշյալի կապակցությամբ կարևոր է լաբորատոր հետազոտությունների համապարփակ փորձաքննությունը:

Հետազոտության առավել հուսալի մեթոդներից մեկը, որն իրականացվում է հիվանդանոցների և կլինիկաների լաբորատորիաներում, մանրէաբանական է: Սա բավականին բարդ, բայց շատ կարևոր վերլուծություն է, որի համաձայն ՝ գիտնականները կարող են ճշգրիտ պատմել, թե ինչ պաթոգեն է առաջացրել անբավարարությունը:

Ամենից հաճախ, պարզ դազգահը հանդիպում է այնպիսի հայեցակարգի, ինչպիսին է ետ ցանքս: Իրականում սա ընդամենը մանրէաբանական մեթոդի բաղադրիչներից մեկն է:

Բակտերիոլոգիական հետազոտության մեթոդը մարդու կողմից կենսաբանական նյութի վերցումն է հետագա հետազոտությունների նպատակով, և նյութը կուսումնասիրվի դրա մեջ որոշակի մանրեների առկայության համար: Դա անելու համար խողովակների հավաքված պարունակությունը տեղադրվելու է հատուկ միջավայրում, որոնցում մանրեները «աճեցվելու են»: Եվ ըստ այն մասին, թե որտեղ կա աճ և վերարտադրություն, կորոշվի վարակի աղբյուրը:

Հետազոտությունների այս տեսակը տարածված է վարակիչ հիվանդությունների ոլորտում, երբ ճիշտ բուժում ընտրելու համար անհրաժեշտ է ճիշտ իմանալ պաթոգենը, քանի որ որոշ մանրէներ դիմացկուն են նույնիսկ գործողությունների լայն սպեկտրի ամենաուժեղ հակաբիոտիկների դեմ:

Բացի այդ, այս տեսակի հետազոտությունն օգտագործվում է բազմաթիվ սանիտարահիգիենիկ ստուգումների միջոցով սննդի հաստատություններում `հիվանդության տարածումը կանխելու համար:

Այսօր հաճախ օգտագործվում է բակտերիոլոգիական մեթոդը, կամ, ինչպես ավելի հեշտ է ասել, բակտերիալ մշակույթը, և մասնագետի հիմնական խնդիրն է անձից նյութեր վերցնելը, մինչև նրան հակամանրէային թերապիա չեն տրվի:

Մանրէաբանությունը այն ճշգրիտ գիտություններից մեկն է, որը չի հանդուրժում սխալները: Այդ պատճառով մանրէաբան դառնալը այնքան էլ հեշտ չէ: Մեզ պետք է համառություն, ուշադրություն և նաև կամք, քանի որ հաճախ անհրաժեշտ է ամիսներ շարունակ նստել նույն նյութի վրա, որպեսզի գոնե ինչ-որ արդյունք ստանանք:

Մանրէաբանության մեջ հետազոտության բակտերիոլոգիական մեթոդը կարևոր է, քանի որ այն թույլ է տալիս ուսումնասիրել բակտերիաները, դիտել դրանք նրանց համար բարենպաստ միջավայրում, ինչպես նաև ուսումնասիրել որոշակի դեղամիջոցի արձագանքը:

Բացի այդ, այսօր մանրեների ուսումնասիրության շնորհիվ հնարավոր է դարձել որոշել, թե որ պաթոգենն է առաջացնում որոշակի հիվանդություն և փրկել բազմաթիվ կյանքեր: Ահա թե ինչու այս մեթոդը գրավում է այդպիսի կարևոր տեղ մանրէաբանության մեջ:

Ստուգեք նյութը

Առավել հուսալի արդյունքներ ստանալու համար լաբորատորիայի աշխատողը կամ բուժքույրը պետք է հետևեն հիգիենայի բոլոր ընթացակարգերին, ինչպես նաև լավ ստերիլիզացնեն գործիքը: Եվ միայն դրանից հետո կարող եք նմուշներ վերցնել:

Ամենից հաճախ բակտերիոլոգիական հետազոտության համար նյութեր վերցվում են անձից.

1. Ecesարպ: Սովորաբար, նման վերլուծությունը սահմանվում է, եթե մարդը ունի աղիքային վարակի բոլոր ախտանիշները: Սա անհրաժեշտ է, քանի որ մարմնում մտնող գրեթե բոլոր մանրէները ունեն կործանարար ազդեցություն, և ոչ բոլոր հակաբիոտիկները կարող են դրականորեն ազդել բոլոր տեսակի պաթոգենների վրա:
2. Լորձ է նազոֆարնից և ֆարնից: Ամենից հաճախ, քթի կոկորդի, ինչպես նաև երկարատև մռայլ քթի դեպքում, կատարվում են նազոֆարնից և ֆարինգից թեստեր, քանի որ շատ դեպքերում, եթե դա տեղի է ունենում, պաթոգենը շատ ավելի լուրջ է, քան բժիշկները առաջարկում են նախքան արդյունքները ձեռք բերելը:
3. Նրանց բրոնխների թքել: Եթե \u200b\u200bմարդը թոքաբորբ է ունենում, ապա նրանք անպայման կուղարկվեն այս վերլուծությունը կատարելու համար:
4. Մեզի: Միզաքար հիվանդի համար `բակտերիոլոգիական հիվանդություն` սեռական համակարգի կասկածելի վարակի դեպքում:
5. Ուղեղային հեղուկ: Երբեմն հիվանդները հիվանդանոց են ընդունվում ծայրահեղությունների կաթվածով, բայց նա չունի այլ հիվանդությունների ախտանիշներ, այսինքն ՝ ամեն ինչ կարգին է ուղեղի գործունեության հետ, ինչպես նաև նյարդային վերջավորությունների երկայնքով անցկացում: Այստեղ պատճառը կարող է կայանալ վարակի ներթափանցման ողնաշարի մեջ: Դա բանաստեղծն է, որպեսզի հնարավորինս շուտ պարզվի պատճառը, անհրաժեշտ է վերցնել ցանքը:
6. Բորբոքման ֆոկուսների պարունակությունը:
7. Կիստայի պարունակությունը:

«Բուսական աշխարհի վրա ցանքս» վերլուծության վերաբերյալ լրացուցիչ տեղեկություններ կարելի է գտնել տեսանյութում:

Մարդու մարմնից ստացված այս նյութերի շնորհիվ է, որ հնարավոր է ճշգրիտ ուսումնասիրություն կատարել և բացահայտել խնդիրը: Իշտ է, չնայած մանրէաբանության բազմաթիվ առաջընթացներին, բակտերիոլոգիական կուլտուրան այդքան արագ չի անում:

Արդյունքների ստացման վերջնաժամկետներ

Չնայած այն հանգամանքին, որ բոլոր մասնագետները ցանկանում են հնարավորինս արագ ձեռք բերել թեստերը, և հաճախ անգամ նստելու և սպասելու ժամանակ չկա, կան որոշակի ժամկետներ, որից հետո կարող եք ստանալ ուսումնասիրության արդյունքները:

Մանրէաբանության մեջ կան հստակ ժամանակացույցեր, որոնք նման են նման բանին.

• Եթե \u200b\u200bfeces վերցվել է վերլուծության համար, ապա արդյունքը կարելի է ստանալ հինգ օրվա ընթացքում: Ամենավատ դեպքում դա կարող է տևել մինչև մեկ շաբաթ: Բայց արդեն հինգերորդ օրը բժիշկները կարող են մոտավորապես գլորվել պաթոգենի մասին:
• Եթե \u200b\u200bթեստերը վերցվել են նազոֆարինից, ապա միջին հաշվով վեց օրվա ընթացքում արդյունքները պատրաստ կլինեն:
• Եթե \u200b\u200bվերլուծությունն իրականացվել է, ապա դուք պետք է սպասեք տասը օր, քանի որ վերլուծությունը շատ ծավալուն է և շատ ավելի շատ ժամանակ է պահանջում:
• Եթե \u200b\u200bձեզ հարկավոր է պարզել մարմնի բուսական աշխարհը, ապա ձեզ հարկավոր է սպասել չորսից յոթ օր ՝ կախված նրանից, թե ինչպես են մանրեները դրսևորվելու:
• Եթե \u200b\u200bկատարվել է միզասեռական տրակտի վերլուծություն, ապա ճշգրիտ արդյունքները պատրաստ կլինեն մեկ շաբաթվա ընթացքում, այսինքն ՝ 7 օրվա ընթացքում:

Այն դեպքում, երբ թեստերը վերցվում են հիվանդանոցում գտնվող մի հիվանդի կողմից, այդ դեպքում նրա հաճախող բժիշկն արդեն չորրորդ կամ հինգերորդ օրը կկարողանա պարզել արդյունքները, քանի որ առավել հաճախ լաբորատորիան գտնվում է ուղղակիորեն հիվանդանոցում:

Բայց եթե թեստերը ներկայացվում են պարզ քաղաքային կլինիկայում, ապա ձեզ հարկավոր է պատրաստվել հետաձգումների: Որպեսզի արդյունքները հնարավորինս արագ ստանան, և որպեսզի դրանք հնարավորինս հուսալի լինեն, ավելի լավ է ուղղակիորեն դիմել քաղաքի լաբորատորիա: Նրանցից յուրաքանչյուրը ծառայություններ է մատուցում վարձավճարով:

Anyանկացած այլ ուսումնասիրության նման, մանրէաբանական մեթոդը ներառում է մի քանի փուլ, որոնցից յուրաքանչյուրը ոչ պակաս կարևոր է, քան նախորդը:

Առաջին փուլը ներառում է.

1. Պատրաստում: Անհրաժեշտ է ճիշտ վերցնել թեստային նյութը, բերել լաբորատորիա, ինչպես նաև անհրաժեշտության դեպքում մշակել այն:
2. Հարստացում: Այս ընթացակարգն իրականացվում է միայն այն դեպքում, եթե արդյունքում ստացված նյութում մանրէների քանակը բավարար չէ: Ամենից հաճախ դա տեղի է ունենում արյան հետ միասին: Այս դեպքում արյան մի մասը տեղադրվում է տաք տեղում ջերմաստիճանում, որը կխրախուսի մանրէները բազմապատկելու համար:
3. Մանրադիտակ Բոլոր վերը նշված ընթացակարգերը իրականացնելուց հետո անհրաժեշտ է զննել մանրադիտակի տակ գտնվող նյութը `որոշելու միկրոֆլորան, քանակը, ինչպես նաև հիմնական հատկությունները:
4. Գաղութների ստեղծում: Այն բանից հետո, երբ մանրադիտակի տակ հայտնաբերվել են տարբեր միկրոֆլորաներ, դրանցից յուրաքանչյուրը առանձնացված է և տեղադրվում է հատուկ տարայի մեջ:

Երկրորդ փուլը ներառում է.

1. Գաղութների հատկությունների ուսումնասիրությունը: Այս ընթացակարգը ներառում է մանրեների վարքի ուսումնասիրություն, թե որքան արագ են դրանք բազմապատկվում, ինչպես են հարմարվում և այլն: Այն դեպքում, երբ մեկ գաղութում ձևավորվել են ևս մի քանիսը, անհրաժեշտ է ուսումնասիրել յուրաքանչյուրի հատկությունները:
2. Մաքուր մշակույթ: Այստեղ գաղութներից յուրաքանչյուրը տեղադրվում է դրա համար հատուկ որոշված \u200b\u200bկոնտեյներով և հետևում, թե ինչ կլինի հետո:

Երրորդ փուլը ներառում է.

1. Մշակույթի աճի և մաքրության մակարդակի չափում: Կախված նրանից, թե որքան արագ է տեղի ունեցել բուծումը և նաև այն, թե արդյոք դրանից են առաջացել այլ մշակույթներ, կարելի է որոշել մանրէների ընտանիք: Այսպիսով, լուծույթի ներկման գույնի համաձայն, գիտնականները կարող են ճշգրիտ ասել, թե ինչպես է մանրէը մարմնում ապակառուցողական ազդեցություն ունենում:
2. Ստուգեք հակաբիոտիկներ: Այն բանից հետո, երբ մասնագետը կարողացավ ճշգրիտ որոշել մշակույթի տեսակը, նա պետք է ստուգի այն որոշակի հակաբիոտիկների նկատմամբ արձագանքելու համար:

Բակտերիոլոգիական հետազոտության մեթոդը բավականին բարդ գործընթաց է, որը պահանջում է կենտրոնացում և համբերություն: Ահա թե ինչու բժշկական կրթություն ստացող ոչ բոլոր մարդիկ են ցանկանում դառնալ մանրէաբան:

Դուք սխալ եք նկատել: Ընտրեք այն և սեղմեք Ctrl + Enterմեզ տեղեկացնել:

Բակտերիոլոգիական մեթոդը բաղկացած է պաթոգենի մաքուր մշակույթի մեկուսացումից (նույն տեսակ բակտերիաներ պարունակող բնակչություն) և այդ պաթոգեն հայտնաբերելը բակտերիոլոգիական հետազոտության հիմնական մեթոդն է:

Բակտերիոլոգիական լաբորատորիաներում միկրոօրգանիզմների հատկությունների ուսումնասիրությունը `որոշակի համակարգված խմբին պատկանելու (տեսակներ, սեռ) պատկանելու համար, կոչվում է դրանց նույնականացում:

Ընդհանուր առմամբ, մանրէաբանական հետազոտության մեթոդը բազմաֆազ բակտերիոլոգիական ուսումնասիրություն է, որը տևում է 18-24 ժամ:

Մանրէաբանական մեթոդ - ինչպես է այն իրականացվում:

Բակտերիոլոգիական մեթոդով անաէրոբ մշակույթները տեղադրվում են անաերոստատում: Օդը հեռացվում է փուչիկից և փոխարինվում է գազի խառնուրդով, որը թթվածին չի պարունակում:

Բակտերիոլոգիական մեթոդի հիմքը պաթոգենի մաքուր մշակույթի ընտրությունն է, որը տեղի է ունենում ուսումնասիրության առաջին փուլում: Պաթոգենի մաքուր մշակույթը ընդգծելու համար կատարվում է վերցված նյութի ցանքս: Սերմանումը կատարվում է, որպես կանոն, պինդ սննդանյութերի վրա, որոնք ընտրվում են նախատեսված պաթոգենի հատկությունների հիման վրա:

Հնարավորության դեպքում, բակտերիոլոգիական մեթոդը օգտագործում է լրատվամիջոցներ, որոնց վրա աճում են միայն հատուկ տեսակի բակտերիաներ `սելեկտիվ լրատվամիջոցներ կամ մեդիա, որոնք տարբերակում են ենթադրյալ պաթոգենը այլ միկրոօրգանիզմներից կամ, այլ կերպ, դիֆերենցիալ ախտորոշիչ լրատվամիջոցներից:

Օրինակ ՝ աղիքային ինֆեկցիաների բակտերիոլոգիական ախտորոշման մեջ - Էնդո միջին, թելուրիտ մեդիան օգտագործվում է դիֆթերիայի բասիլները մեկուսացնելու համար և այլն: Նման միջոցի օրինակ է արյան ագարը:

Բակտերիալ մշակույթների մեկուսացման հետ կապված բոլոր մանիպուլյացիաները կատարվում են այրիչի կրակի վերևում:

Բակտերիոլոգիական մեթոդով նյութը սերմանվում է սննդանյութերի վրա `ապակու կամ մետաղի սպաթուլայի միջոցով, կամ մանրէային հանգույցով, այնպես որ թեստային նյութի մանրէները ցրվում են սննդանյութերի միջին մակերևույթի վրա: Նման ցրման արդյունքում յուրաքանչյուր մանրէային բջիջ մտնում է իր սեփական միջին տարածքը:

Պաթոգեն մաքուր մշակույթը պաթոլոգիական նյութից մեկուսացնելիս, որը էականորեն աղտոտված է արտառոց միկրոֆլորայով, հաճախ օգտագործվում է մաքուր մշակույթ մեկուսացնելու կենսաբանական եղանակը: Նրանք դա անում են հետևյալ կերպ. Նրանք վարակվում են պաթոգենին զգայուն լաբորատոր կենդանիների թեստային նյութով: Կենսաբանական մեթոդի մեկ այլ օրինակ է `սպունգում թոքաբորբի համար հիվանդին զննելիս, նյութը ներերակային կերպով ընդունվում է սպիտակ մկների վրա: 4-6 ժամ անց նրանց արյունից ստացվում է մաքուր թոքաբորբի մշակույթ:

Այն դեպքում, երբ հետազոտության բակտերիոլոգիական մեթոդի արդյունքում պաթոգենի փոքր քանակությունը ենթադրվում է փորձարկման նյութում, ցանումը կատարվում է հեղուկ սննդանյութի վրա դրա կուտակման համար, այսպես կոչված, հարստացման միջոց, որը օպտիմալ է տվյալ միկրոօրգանիզմի համար: Այնուհետև իրականացեք հեղուկ սննդարար միջավայրից փոխանցումը Petri- ի ճաշատեսակների վրա թափված ամուր լրատվամիջոցներին: Պաթոգենի հետ ցանված միջին խառնուրդը տեղադրվում է ջերմակարգում, սովորաբար որոշակի ջերմաստիճանում, ինչը կարևոր է մանրէաբանական մեթոդի համար:

Բակտերիոլոգիական հետազոտության մեթոդի երկրորդ փուլում ուսումնասիրվում են ամուր սնուցիչ միջավայրում աճեցված և մեկ մանրէային բջիջից բխող մանրէների գաղութները: (գաղութը պաթոգենի մաքուր մշակույթ է): Գաղութների մանրադիտակային և մակրոոսկոպիկ զննումն իրականացվում է արտացոլված և փոխանցվող լույսի ներքո. Մերկ աչքով, մանրադիտակի փոքր խոշորացման ներքո, օգտագործելով խոշորացույց:

Նշվում են գաղութների մշակութային հատկությունները. Դրանց ձևը, չափը, գույնը, եզրերի և մակերեսի բնույթը, կառուցվածքը, հյուսվածքը: Հաջորդը, բծախնդրության պատրաստման համար օգտագործվում է նշանակված գաղութներից յուրաքանչյուրի մի մասը: Գրամ քսուկները վիտրաժ են, մանրադիտակային, որոշելով ընտրված մշակույթի թուրմը (գույնի հետ կապը) և ձևաբանական հատկությունները և միևնույն ժամանակ ստուգում դրա մաքրությունը:

Գաղութի մնացորդը ենթամշակվում է փորձնական խողովակների մեջ `այս տեսակի համար օպտիմալ միջոց ունեցող միջոցներով, օրինակ, փարթամ ագարով, ավելի ամբողջական ուսումնասիրության համար մաքուր մշակույթ կուտակելու համար: Խողովակները տեղափոխվում են 18-24 ժամ տերմոստատի մեջ: Երկրորդ փուլում, վերը նշված ուսումնասիրություններից բացի, հաճախ հաշվվում է աճեցված գաղութների թիվը:

Սա առանձնահատուկ նշանակություն ունի օպորտունիստական \u200b\u200bմիկրոօրգանիզմների հետևանքով առաջացած հիվանդություններում: Նման հիվանդությունների դեպքում թույլատրվում է դատել ցանկացած պաթոգենի առաջատար դերը միայն դրա պարունակությամբ պաթոլոգիական նյութում `բավարար քանակությամբ և այս պաթոգենի գերակշռությունը մեկ այլ բուսական աշխարհի նկատմամբ:

Նման ուսումնասիրություն կատարելու համար նախապատրաստվում են ուսումնասիրված փորձարկման նյութի հաջորդական նոսրացումները, որից դրանք սերմանվում են սննդանյութեր պարունակող ափսեներով, աճեցված գաղութների քանակը հաշվարկվում, բազմապատկվում է նոսրացմամբ, որից որոշվում է նյութում առկա միկրոօրգանիզմի պարունակությունը:

Պաթոգենի մեկուսացված մաքուր մշակույթի հայտնաբերումը և այս մշակույթի համար հակաբիոտիկների և այլ քիմիաթերապևտիկ դեղամիջոցների նկատմամբ զգայունության որոշումը մանրէաբանական մեթոդի երրորդ փուլն է: Ընտրված բակտերիալ մշակույթի նույնականացումն իրականացվում է թուրմային, ձևաբանական, կենսաքիմիական, մշակութային, տոքսինոգեն, անտիգենիկ հատկություններով:

Առաջին քայլը `հալած ագարի վրա աճեցված մշակույթից քսուք վերցնելը, մանրէների մորֆոլոգիան ուսումնասիրելը և աճեցված մանրէների մշակույթի մաքրությունը ստուգելը: Այնուհետև անցկացրեք ընտրված մաքուր մշակույթի բակտերիաների ցանքս Giss- ի միջոցի վրա: Կենսաքիմիական հատկությունները որոշելու համար խորհուրդ է տրվում ցանել այլ լրատվամիջոցների վրա:

Բակտերիաների ֆերմենտային կամ կենսաքիմիական հատկությունները պայմանավորված են ֆերմենտներով, որոնք ներգրավված են սպիտակուցների, ածխաջրերի խզման մեջ, ինչը հանգեցնում է տարբեր ենթաշերտերի վերականգնման և օքսիդացման:

Ավելին, մանրէների տեսակներից յուրաքանչյուրը դրա համար ֆերմենտների անընդհատ շարք է ստեղծում: Ամենից հաճախ, անտիգենիկ հատկությունները ուսումնասիրելիս օգտագործվում է ապակու վրա ագլուտացման ռեակցիա:

Օգտագործելով տոքսինների չեզոքացման ռեակցիա ՝ in vivo կամ in vitro հակատոքսինով, որոշվում է մանրէաբանական տոքսինի ձևավորումը: Որոշ դեպքերում ուսումնասիրվում են նաև վիրուսության այլ գործոններ: Վերոնշյալ ուսումնասիրությունները, որոնք իրականացվում են մանրէաբանական լաբորատորիայում, թույլ են տալիս որոշել պաթոգենի սեռը կամ տեսակը:

Այդ թվում `վարակի աղբյուրը հայտնաբերելու համար, հիվանդության համաճարակային շղթան հայտնաբերելու համար, իրականացնել մանրէների ներանձնային առանձնահատկություն: Բակտերիաների ներանձնահատուկ նույնականացման էությունը ֆագովարի կամ ֆագոտիպի որոշումն է, մեկուսացված հակածին մանրէների տարբեր հատկությունների ուսումնասիրությունը: Ֆագոտիպի որոշման գործընթացը կոչվում է ֆագոտիպավորում: Phagotyping- ը իրականացվում է տիֆոիդ տենդով, ստաֆիլոկոկային վարակով, պարատիպոիդ B- ով:

Մի շարք ախտորոշիչ փուլեր կիրառվում են կաթիլային կտրվածքով `մշակույթի միջին ափսեի մեջ, որը սերմացվում է սպաթուլայի միջոցով` օգտագործելով մաքուր մշակույթ: Եթե \u200b\u200bմշակույթը զգայուն է այս ֆագի նկատմամբ, բակտերիոլոգիական ուսումնասիրությունների արդյունքում նկատվում են այսպես կոչված բացասական գաղութներ (ափսեներ), որոնք նման են ոչնչացված բակտերիաների տարածքների կլորացված կազմավորումների: Պաթոգենի մշակույթը կարող է զգայուն լինել մի քանի կամ մեկ փուլերի նկատմամբ:

Բակտերիաների նկատմամբ թմրամիջոցների դիմացկուն ձևերի լայն տարածման պատճառով ռացիոնալ քիմիաթերապիա նշանակելու համար անհրաժեշտ է որոշել հակաբիոտիկների օրինակը `մեկուսացված մաքուր պաթոգեն մշակույթի քիմիաթերապևտիկ դեղամիջոցներին դիմադրություն կամ զգայունություն: Անտիբիոգրամների դեպքում օգտագործվում է կամ թղթի սկավառակի մեթոդը, կամ առավել ճշգրիտ, բայց ծանրաշարժ սերիական նոսրացման մեթոդը:

Թղթի սկավառակի մեթոդը հիմնված է սկավառակների շուրջ բակտերիալ վերարտադրությունը ճնշելու գոտու որոշման վրա, որոնք հագեցած են հակաբիոտիկների միջոցով: Սերիական նոսրացման մեթոդը օգտագործելու դեպքում փորձարկման խողովակներում նոսրացվում է քիմիական պատրաստուկ `հեղուկ սննդանյութ ունեցող հակաբիոտիկ, որից հետո նույն քանակությամբ մանրէներ սերմացվում են խողովակների մեջ: Բակտերիալ աճի բացակայության կամ ներկայության համար արդյունքները գրանցվում են: Ստրուկների ինքնությունը որոշելու համար բակտերիոլոգիական հետազոտության մեթոդի արդյունքում, արդյունքում ստացված հակաբիոտոգրամը կարող է ծառայել նաև համաճարակաբանական նպատակներով:

Կրկնակի ուսումնասիրություններ կարող են իրականացվել մանրէների փոխադրման նույնականացման դեպքում, քանի որ պաթոգենը չի կարող հայտնաբերվել նյութի մեկ մասում:

Ներկայումս ժամանակակից աշխարհում կան արագացված մեթոդներ `որոշելու բակտերիաների տեսակը և սեռը: Այսպիսով, Ռուսաստանում նրանք օգտագործում են ցուցիչ թերթերի համակարգ `NIB, որը թույլ է տալիս մեկուսացնել մաքուր մանրէային մշակույթը 6-12 ժամ հետո և առանց մեծ քանակությամբ սննդանյութեր օգտագործելու: Իմունոֆլորեսցիայի մեթոդը լայնորեն օգտագործվում է նաև վարակիչ հիվանդությունների արագ ախտորոշման համար (տե՛ս Սերոլոգիական ուսումնասիրություններ):