Выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.
Анализ проводится в целях обнаружения Treponema pallidum (бледной трепонемы) - бактерии, которая вызывает сифилис - хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение. Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.
Различают несколько стадий сифилиса. Первичная наступает примерно через 2-3 недели после заражения. Одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, появляются, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Зачастую твердый шанкр безболезненный и может оставаться незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Исчезает язва через 4-6 недель.
Вторичный сифилис начинается через 2-8 недель после первого появления твердого шанкра. Эта стадия заболевания характеризуется появлением на коже розеолезно-папулезной сыпи, чаще на ладонях и подошвах. Бывают и другие симптомы, такие как лихорадка, усталость, опухание лимфатических узлов, боль в горле и ломота в теле. Если сифилис не лечить, он может развиваться в скрытой форме, при которой у инфицированного человека не проявляется никаких симптомов, но он продолжает оставаться носителем инфекции. Эта стадия иногда длится годами.
У 15 % больных, которые не лечатся, проявляется поздний, или третичный, сифилис, который может продолжаться несколько лет и в заключение приводить к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам (нейросифилису), болезням сердца и даже к смерти.
Существует несколько методов, которые могут быть использованы для проверки на сифилис. Один из них позволяет определять антитела к T. pallidum в крови. Этот анализ наиболее чувствительный и специфический для обнаружения трепонемных антител на всех стадиях, в том числе и на ранней.

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG.
В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени.
Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum.
После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более, антитела IgG сохраняются иногда пожизненно. В этом случае необходимо провести уточняющий дополнительный тест - нетрепонемный антикардиолипиновый тест.

Для чего используется анализ?

• Для диагностики сифилиса.
• Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается анализ?

• При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле.
• Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи.
• При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его.
• Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом).
• Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяцев, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Что означают результаты?

Положительный результат
Положительный результат у ранее серонегативного пациента означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.
Обнаружение антител к трепонеме в крови новорождённого помогает подтвердить диагноз «врождённый сифилис».
Кроме того, причиной положительного результата может быть третичный или скрытый сифилис.

Отрицательный результат
Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Что может влиять на результат?
Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности.

Срок исполнения: 1 рабочий день.

ВАЖНО! Сергей Бубновский: Эффективное средство от венерических заболеваний существует... Читайте далее >>

Бледная трепонема (Treponema pallidum (Трепонема паллидум)) была открыта E. Hoffman и F. Schaudin в 1905 году. Микроорганизм является возбудителем такого венерического заболевания, как сифилис. Сифилис относится к инфекциям, передающимся половым путем (ИППП). В настоящее время инфекция поддается скринингу. Скрининговая диагностика основана на обнаружении антител в крови, формирующихся иммунной системой человека на антигены возбудителя.

Морфология и биология бледной трепонемы

Микроорганизм относится к семейству Спирохет (Spirohaetacea) и роду Трепонема (Treponema). Бледная трепонема (БТ) приобрела свое название по причине слабой способности бактерии воспринимать окраску. Микроорганизм обладает спиралевидной формой. Завитки спирали расположены на одинаковом расстоянии друг от друга.

Важнейшей функцией БТ является движение, что обуславливает ее высокую инвазивность и возможность распространяться по организму человека. Трепонемы отличаются от других микроорганизмов характерными движениями - поступательное, вращательное, волнообразное, сгибательное, маятникообразное. Движения бактерии плавные, что используется как дифференциально-диагностический признак.

Трепонемы размножаются поперечным делением. Время деления составляет около 30 часов.

В тканях человека трепонема встречается в двух формах: в форме патогенного существования (спиралевидной) и устойчивых формах выживания (L-формы, цисты, полимембранные фагосомы). В устойчивые формы бактерия переходит при неблагоприятных условиях для существования (под воздействием иммунной системы, антибиотиков). Образование этих форм – не только способ сохранения возбудителя в организме в течение длительного времени, но и развития инфекции. В случае благоприятного изменения условий существования БТ приобретает возможность вновь перейти в патогенную спиралевидную форму.

Бактерия малоустойчива к внешним воздействиям. Оптимальной температурой для Трепонема паллидум является 37 градусов. Вне организма человека при температуре в 40-42 градуса трепонемы погибают в течение 3-6 часов. В крови при температуре 4 градусов БТ сохраняют свою патогенность не менее суток. Все известные антисептики в обычных концентрациях губительно действуют на бактерию.

1. (первый симптом заболевания, возникающий на месте внедрения БТ через слизистые оболочки и кожу, в области «входных ворот» инфекции).
2. Регионарный лимфаденит (увеличение лимфатических узлов в непосредственной близости от первичной сифиломы).
3. Специфический лимфангит (воспаление лимфатического сосуда на протяжении от первичной сифиломы до регионарных лимфатических узлов).
4. Специфический полиаденит (увеличение в размере нескольких групп лимфатических узлов, удаленных от первичной сифиломы).
5. Продромальные явления (общие реакции организма - недомогание, усталость, повышение температуры тела и др.).

Половым путем заражаются более 95% пациентов при различных вариантах половых контактов (традиционные и нетрадиционные). Пот и моча пациентов не заразны. Грудное молоко и сперма заразны даже при отсутствии симптомов заболевания в области молочных желез или половых органов.

Лабораторная диагностика

Для подтверждения диагноза «сифилис» требуется обязательное лабораторное исследование. Все методы лабораторной диагностики инфекции условно можно разделить на:

1. Методы непосредственного выявления БТ в материале из очагов поражения (прямые тесты): темнопольная микроскопия; молекулярно-биологические методы (полимеразная цепная реакция); заражение лабораторных животных инфицированным материалом от пациентов.
2. Серологическую диагностику.
3. Гистоморфологические методы (исследование пораженных тканей на наличие специфической сифилитической гранулемы).
4. Исследование спинномозговой жидкости (при нейросифилисе).

Методы непосредственного выявления возбудителя в материале

Темнопольная микроскопия основана на феномене Тиндаля. Для выполнения исследования используются микроскопы со специальным объективом. Исследованию на Treponema pallidum подлежат все язвенные и эрозивные высыпные элементы, похожие на первичные и вторичные сифиломы. При невозможности исследования сыпи рекомендуется пунктировать увеличенный регионарный лимфатический узел. При микроскопии в темном поле должны появиться лейкоциты, эпителиальные клетки и движущиеся светящиеся частицы. БТ выглядит как тонкий нежный пунктир или тонкая спираль серебряного оттенка, которая совершает плавные движения.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет обнаружить единственную молекулу ДНК возбудителя сифилиса среди огромного числа других молекул. Метод ПЦР при хорошей подготовке образцов и правильном техническом проведении фактически не дает ложных результатов и очень оправдан для при небольшом количестве возбудителя в исследуемом материале. Пока ПЦР является дорогостоящим методом исследования и труднодоступным.

Заражение БТ лабораторных животных как метод прямого уже давно не применяется для диагностики. Причины следующие: трудоемкость, дороговизна, необходимость содержания животных, длительность получения результата. Наиболее удобным и чувствительным лабораторным животным для является кролик. Сегодня этот метод используется только в крупных исследовательских центрах в качестве «золотого стандарта» для оценки чувствительности других тестов.

Серологическая диагностика

С помощью этих тестов обнаруживаются в анализе крови или в спинномозговой жидкости антитела (реагины) класса M и G (IgM и IgG) к липидам клеточной стенки бледной трепонемы. Антитела появляются приблизительно через неделю после появления первичной сифиломы в крови в достаточном количестве для определения этими тестами.

Следует напомнить: IgM (острофазовые антитела) появляются уже через 2 недели после заражения, а IgG начинают образовываться в организме пациента только спустя 4 недели от момента заражения. До этого срока антитела нельзя обнаружить.

При сифилисе истинный иммунитет не формируется. У пациентов развивается инфекционный (нестерильный) иммунитет, сохраняющийся в течение нахождения возбудителя в организме пациента. Максимальная активность иммунитета наблюдается во вторичном периоде сифили­са.

Все условно можно разделить на две группы.

Отборочные реакции. Используются в качестве скринингового исследования (массовое серологическое обследований людей на сифилис): лиц декретированных профессий, пациентов поликлиник и соматических стационаров, а также для экспресс-диагностики в кожно-венерологических диспансерах. Они должны быть технически просты, быстро выполнимы, чувствительны и экономически выгодны. При этом специфичность этих реакций недостаточно высока, поэтому для окончательной диагностики сифилиса они не применяются. Наиболее известными отборочными тестами являются:

1. РСКк (реакция Вассермана) - реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном. Не используется на сегодняшний день.
2. МРП - микрореакция преципитации инактивированной сывороткой. Широко используется в медицинской практике с 80-х годов прошлого века.
3. RPR - тест быстрых плазменных реагинов. Тест основан на том же принципе, что и МРП, но выполняется с плазмой крови.

Подтверждающие (специфические) реакции. Используются для подтверждения наличия у пациента сифилиса. Также эти тесты еще называются трепонемными, потому что в их основе лежит применение антигенов трепонемного происхождения. Подтверждающими тестами являются:

1. Иммуноблотинг (Western Blot).
2. ИФА (ELISA) - иммуноферментный анализ.
3. РПГА (TPHA) - реакция пассивной гемагглютинации.
4. РИФ (FTA) - реакция иммунофлюоресценции;
5. РИБТ (TPI) - реакция иммобилизации бледных трепонем.
6. РСКт (реакция Вассермана) - реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном.

От использования реакций Вассермана (RW) давно отказались. Основными недостатками реакции является необходимость предварительной подготовки исходных реагентов и исследуемых сывороток, сложность постановки реакции, а также низкая чувствительность реакции, наличие ложноположительных результатов. В целом реагенты и саму реакцию сложно стандартизировать.

На сегодняшний день часто используют для определения антител 3 метода - ИФА, РИФ и РПГА, являющиеся высокочувствительными. Их оценивают от 2+ до 4+. Эти методы становятся положительными уже к концу инкубационного периода (приблизительно за неделю до появления первичной сифиломы). ИФА и РПГА могут использоваться в качестве скрининговых тестов в случае применения неспецифического антигена.

Кто сказал, что вылечить венерические заболевания тяжело?

• Невероятно… Можно вылечить сифилис, гонорею, микоплазмоз, трихомониаз и другие венерические заболевания навсегда!
• Это раз.
• Без приема антибиотиков!
• Это два.
• За неделю!
• Это три.

Эффективное средство существует. Перейдите по ссылке и узнайте что рекомендует венеролог Сергей Бубновский!

Treponema pallidum - очень опасная бактерия, возбудитель сифилиса. Она стремительно проникает в человеческий организм и с такой же скоростью в нем размножается, при этом сильно поражая внутренние органы.

Описание бактерии

Трепонема паллидум - бактерия, имеющая клеточную оболочку. Способна жить некоторое время в окружающей среде. Эта бактерия относится к спирохетам. Она выглядит как спираль с мелкими завитками, которых может быть от восьми до двенадцати штук. Как раз по их количеству и форме эта бактерия определяется, когда делается микроскопия мазка.

Этот микроорганизм почти не окрашивается красителями, которые используются в микробиологии. Для того чтобы увидеть бактерию, применяется контрастная микроскопия. Связано это с тем, что оболочка микроорганизма очень тонкая и под воздействием спирта быстро повреждается (а он как раз используется при фиксации окраски). При посеребрении бактерии она приобретает рыже-черный цвет.

Как долго живет бактерия

Treponema pallidum при попадании на предметы (в основном постельное белье и полотенца) сохраняется, пока не высохнет субстрат, в котором она находилась. Чаще всего это слюна, выделяемая жидкость из язв и эрозий, сперма и т. д. При температуре пятьдесят пять градусов бактерия может жить приблизительно пятнадцать минут. При более высокой гибнет значительно быстрее. Во время кипячения бактерия умирает за считаные секунды, то есть практически моментально.

Что губительно для бактерии

Для трепонемы паллидум губительны некоторые среды и вещества:

• висмут и мышьяк;
• ртуть;
• пенициллин;
• щелочи и кислоты;
• антисептики и дезинфицирующие растворы;
• уксус и спирт;
• УФО и свет.

По данным исследований и экспериментов, проводимых учеными, выяснилось, что эта бактерия иногда может сохраняться некоторое время и в неблагоприятных для нее условиях. Например, в плохой среде, под светом, в высушенном состоянии или при доступе кислорода. Если попадается такой экземпляр микроорганизма, то он может жить в неблагоприятной для него среде до трех лет.

Рост трепонемы и основные антигены

Трепонема паллидум плохо выращивается из-за своей капризности. Клетки куриных эмбрионов и человека для выращивания этого микроорганизма не подходят. Есть два способа, как можно выделить культуру. Первый - заразить бактерией лабораторных кроликов и дождаться развития у этих животных специфического орхита. Второй - трепонему можно вырастить на специальных средах под вазелиновым маслом. Наличие этих микроорганизмов необходимо, чтобы получить антигены, при помощи которых определяется сифилис.

Патогенность трепонемы паллидум

Патогенность бактерии трепонема паллидум имеет свои особенности:

• благодаря наличию белка адгезина, который взаимодействует с фибронектином слизистых оболочек, обеспечивается «прилипание» к клеткам хозяина;
• наличие миофибрилл и спиралевидная форма трепонемы паллидум способствуют глубокому проникновению и обуславливают миграцию по организму;
• антифагоцитарная активность возникает благодаря способности данной бактерии связывать фибронектин;
• воспаление начинается из-за присутствия липопротеиновых оболочек;
• трепонема паллидум устойчива к воздействию антибактериальных препаратов из-за изменчивости антигенных свойств и способности образования Л-форм, что приводит к невозможности создать вакцину;
• эти бактерии способны не только жить в интерстиции, но и размножаться там.

Антитела к бледной трепонеме

Бледные трепонемы в основном собираются на слизистых оболочках. Поэтому с легкостью передаются не только во время полового акта, но и в быту. Чаще всего через полотенца, посуду или поцелуи. К сожалению, человеческий организм не может выработать иммунитет к этим бактериям. Поэтому даже после полного излечения может вновь вернуться.

Для определения заболевания берется кровь на сифилис. У большинства зараженных естьантитела к трепонеме паллидум. При первичном и повторном заболевании - у 88 и 78% больных соответственно. У остальных они или не обнаруживаются, или отсутствуют вовсе. Но отсутствие антител еще не говорит о том, что лечение прошло успешно. На латентной стадии болезни антитела в основном обнаруживаются лишь у 20 процентов больных.

Через 1-2 недели с начала заболевания делается анализ сыворотки. IgM и IgA антитела к трепонема паллидум появляются в сыворотке именно в этот период. В течение периода от полугода до девяти месяцев титры иммуноглобулинов растут, затем начинается снижение их количества. Через время падает ниже определяемых значений и уровень антител. Некоторые не могут передаваться от матери к ребенку.

Антитела IgG появляются через 3-4 недели после заражения сифилисом. А к 6-9 неделе достигают своего пика. Большая концентрация антител сохраняется долго и снижается крайне медленно и только после терапии. А остаточный титр может сохраняться в организме всю жизнь.

Трепонемные антитела могут вырабатываться лишь к трепонеме паллидум. Поэтому при их нахождении можно точно утверждать, что сифилис есть на данный момент или был перенесен ранее.

Симптомы заражения бледной трепонемой

Есть ряд симптомов, указывающих на наличие в человеческом организме трепонемы паллидум. При их появлении необходимо сдать кровь на могут различаться в зависимости от стадии заболевания.

На первой:

• появляются болезненные язвы с расположенным на слизистой рта, прямой кишки или половых органов;
• самостоятельно язвы затягиваются как минимум через три недели, процесс может продлиться до полугода.

На второй:

• на теле появляется сифилитическая симметричная бледная сыпь;
• головные боли, общее недомогание, повышается температура;
• увеличиваются лимфатические узлы;
• иногда могут выпадать волосы, а на гениталиях появляются широкие кондиломы.

На третьей происходит поражение:

• нервной системы;
• головного и спинного мозга;
• внутренних органов;
• костей.

На первой и второй стадиях эффективно комплексное лечение, включающее в себя антибиотики, физиотерапию, иммуностимуляторы и общеукрепляющие препараты. Но если вовремя не обратиться к врачу, то через несколько лет начинается третья стадия заболевания, вылечить которую бывает практически невозможно.

Как обнаруживается

Для определения, есть ли в организме бактерии, вызывающие сифилис, делается соответствующий анализ. Трепонема паллидум усилиями современной медицины может быть выявлена несколькими способами:

• На первой стадии сифилиса больной очень заразен и выделяет в окружающий мир множество бактерий. В этом случае применяется микроскопия мазка. Чтобы получить точные результаты, язвы обрабатывают физраствором для смытия мешающей микрофлоры. Потом производится соскоб и изготавливается мазок.
• Нетрепонемные тесты. Здесь применяются скрининговые методы. Они хороши для первичной диагностики и последующего контроля во время лечения и диспансеризации. Но эти тесты часто дают ложный результат положительный. Трепонема паллидум при этом может в организме отсутствовать. Это происходит потому, что АГ (антитела к антигенам) берутся не возбудителя болезни.
• Трепонемные тесты применяются именно для выявления трепонемы паллидум. Эти методы используются для подтверждения диагноза и исключения сифилиса при ложном скрининговом тесте.

Антитела к Treponema pallidum (Сифилис) (IgM и IgG) ИХЛ (колич.) – метод количественного хемилюминисцентного иммунноанализа для эффективной диагностики сифилиса.Относится к высокочувствительным методам диагностики сифилиса. Определяет в крови антитела классов IgM и IgG (суммарные антитела). Основные показания к применению: диагностика и подтверждение сифилиса, планирование беременности, подготовка к операции, беспорядочные половые контакты, проверка доноров.

Согласно приказу МЗ РФ от 26.03.2001 г. за №87 "О совершенстовании серологической диагностики сифилиса" последовательность обследования пациентов на сифилис представляется следующим образом:

• при первичном обследовании производится постановка отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или её модификации (RPR - РПР, TRUST - ТРАСТ, VDRL - ВДРЛ) в количественном и качественном вариантах и в случае положительного результата - любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ).
• после окончания терапии ставится РМП или её модификация и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года.
• по окончанию этого срока осуществляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании. Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оставаться положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в отдельных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Из существующих серологических методов диагностики сифилиса метод хемилюминисцентного иммуноанализа является одним из наиболее чувствительных методов. Антитела класса IgM к Treponema pallidum появляются в сыворотке крови, начиная со 2 - 4-й недели после инфицирования. В случае успешного лечения титр антител IgM снижается до неопределяемых значений. Антитела класса IgG выявляются обычно на 4-й неделе после заражения и могут сохраняться годами (или пожизненно) после выздоровления. Данный метод разработан для скрининговых исследований выявления антител к антигенам Treponema pallidum. С его помощью можно обнаружить как недавнюю, так и прошедшую инфекцию. Обнаружение суммарных антител к бледной трепонеме в пробе может указывать на недавний, прошедший сифилис и выявляться при успешно вылеченном сифилисе.